El gen crgA es un regulador negativo de la fotocarotenogénesis en el hongo Mucor circinelloides. La secuencia aminoacídica de la proteína CrgA muestra la existencia de un dominio RING-finger, esencial para la función reguladora de CrgA, que define a una familia de ligasas de ubiquitina E3 implicadas en la ruta de degradación ubiquitina-proteasoma.
Este trabajo del equipo de Rosa María Ruiz-Vázquez, de la Universidad de Murcia, demuestra que los niveles celulares de CrgA en estirpes silvestres de Mucor son extremadamente bajos, por lo que han estudiado la posible regulación post-transcripcional de crgA. Mediante mutagénesis dirigida, han observado que la traducción de CrgA se inicia exclusivamente en un codón GUG localizado aguas arriba del primer codón AUG. Esta es la primera vez que se describe la presencia natural de un codón distinto al AUG en una proteína RING-finger reguladora. La extensión 5’ de la secuencia de CrgA desde el AUG previamente propuesto como iniciador hasta el codón GUG identificado, pone de manifiesto la existencia de un dominio RING-finger adicional en el extremo aminoterminal de la proteína. Mutaciones en residuos conservados de este dominio dan lugar a versiones no funcionales de la proteína, lo que indica que este dominio es esencial para la función reguladora de CrgA en la fotocarotenogénesis.
El papel de los dos dominios RING-fingerr en la estabilidad de la proteína CrgA se ha investigado utilizando levaduras. La versión silvestre de CrgA es muy inestable, mientras que versiones de CrgA en las que se han delecionado uno o dos dominios RING-finger son muy estables. La presencia de inhibidores del proteosoma estabiliza la versión silvestre de CrgA en levaduras, lo que sugiere que CrgA es degradada por el proteosoma y que los dominios RING-finger son esenciales para la misma, ayudando a mantener los bajos niveles de CrgA requeridos para una correcta regulación de la fotocarotenogénesis.